Práctica 6 Técnicas de Sedimentación y Flotación

INTRODUCCIÓN

Métodos de Flotación

Los métodos de flotación fecal se utilizan para separar  los parásitos en todos sus estadios (huevos, quistes, larvas) de otros objetos, basados en sus diferentes densidades. La densidad es el peso de un parásito u otro objeto por unidad de volumen, se expresa en forma de gravedad específica.

• Solución salina saturada (Koffoyd yBarber)

Este método cualitativo da muy buenos resultados, es fácil de preparar y se conserva por largo tiempo. Este método es muy útil para la identificación de protozoarios, nematodos y algunos cestodos, tomar en cuenta que en esta solución no flotan algunos huevos como los de Taenia solium.

Práctica 5 Coproparasitoscopico Método de Faust

INTRODUCCIÓN

Las parasitosis intestinales son un conjunto de padecimientos causados principalmente por protozoarios y helmintos y considerados un problema de salud pública.

El examen coproparasitoscopico (CPS) es un conjunto de técnicas diagnósticas que constituyen la indicación para la identificación de la mayoría de las enteroparasitosis. Su eficacia y sensibilidad para establecer un diagnóstico correcto dependen de la adecuada indicación y preparación de la muestra, los datos clínicos y antecedentes de interés que sean aportados al laboratorio y de su correcta y completa ejecución con examen directo microscópico. 

Práctica 4 Coproparitoscopico Directo

INTRODUCCIÓN

Una enfermedad parasitaria o parasitosis es una enfermedad infecciosa causada por protozoos, vermes (cestodos, trematodos, nematodos) o artrópodos. Las parasitosis son estudiadas por la parasitología. No se consideran parasitosis las infecciones por hongos, bacterias o virus que, tradicionalmente, han sido estudiados por la microbiología.

La recogida de las heces requiere de una higiene íntima adecuada mediante la limpieza de la zona perianal y de los genitales externos con agua y jabón. El paciente debe orinar previamente a la defecación dado que las heces mezcladas con orina no serán útiles para el estudio pues pueden estar contaminadas por gérmenes del tracto urinario. El paciente deberá proceder a una nueva limpieza íntima tras la micción y antes de proceder a la defecación. Existen diferentes métodos para la recogida de muestras pero habitualmente al paciente se le aconseja el uso de un recolector de heces de plástico estéril (de venta en farmacias) que se coloca sobre el bidé o bien sobre un recipiente previamente desinfectado. El paciente deberá evitar el uso de sus manos para no contaminar la muestra por lo que deberá ayudarse mediante el uso de unos guantes de látex o de una espátula para la recolección y deberá depositar la muestra en un recipiente estéril específico para ello que será facilitado en el centro o en una farmacia.

El análisis de las heces consiste en la obtención de una muestra de heces procedentes del paciente que posteriormente será conservada en medios adecuados y llevada a analizar en un laboratorio especializado en este tipo de estudios.

Búsqueda de huevos y parásitos: se realiza mediante el uso de diferentes técnicas de laboratorio, permite detectar la presencia de larvas y huevos en las heces y la identificación del parásito.

Práctica 3 Lactobacilos

OBJETIVO
Conocer la técnica de tinción de Gram., conocer el procedimiento e identificar lactobacilos en microscopio. Utilizar correctamente los materiales en esta técnica de tinción.

ITRODUCCIÓN

El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram. positivas como Gram negativas).

El lugol está formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio), el cual está presente para solubilizar el yodo. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta.

Práctica 2 Tinción de Ziehl Neelsen

INTRODUCCIÓN

La tinción de Ziehl Neelsen fue desarrollada inicialmente por Paul Ehrlich para poner de manifiesto la presencia de los bacilos causantes de la tuberculosis en muestras clínicas de pacientes.

Esta técnica es capaz de diferenciar los bacilos Acido Alcohol Resistentes (BAAR).

Ácido-alcohol resistencia es la propiedad física de algunas bacterias a la resistencia a la decoloración de la fucsina básica (rojo) la cual penetra en la célula por acción del fenol y el calor.

Las bacterias ácido-alcohol resistentes no pueden ser clasificados según la tinciónde Gram, la cual es la técnica más común en la microbiología contemporánea, sin embargo puede ser teñido con algunas tinciones concentradas combinadas con calor. Una vez teñida tiene la capacidad de resistir la decoloración de una combinación de alcohol- ácido, el cual es el decolorante más común en los protocolos de tinción de bacterias, de donde viene el nombre Alcohol-ácido resistente.

Práctica 1 Tinción Gram

INTRODUCCIÓN

La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes en el laboratorio bacteriológico y con el que el estudiante debe estar perfectamente familiarizado. Su utilidad práctica es indiscutible y en el trabajo microscópico de rutina del Laboratorio de Microbiología las referencias a la morfología celular bacteriana (cocos, bacilos, positivos, negativos, etc.) se basan justamente en la tinción de gram.

Esta tinción se denominada así por el bacteriólogo danés Christian Gram, quien la desarrolló en 1844. Sobre la base de su reacción a la tinción de Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos, gram positivas y gram negativas (en este caso, los términos positivo y negativo no tiene nada que ver con carga eléctrico, sino simplemente designan dos grupos morfológicos distintos de bacterias).

Práctica No. 24 Extracción de ADN de Chícharos Secos

INTRODUCCIÓN

En las células eucariotas, el ADN se encuentra asociado con proteínas formando estructuras compactas denominadas cromosomas, cada cromosoma consta de una sola molécula de ADN, cuya longitud se encuentra en el orden de varios centímetros.

La separación de ADN requiere de la disociación de esta molécula y las proteínas, para lo cual se utilizan enzimas, detergente y alcohol.

Para realizar la extracción de ADN, se requiere utilizar muestras biológicas que lo contengan.

El aislamiento de ADN es una de las etapas en la investigación en biología molecular para el estudio de uno o más genes. El ADN celular total es usado como patrón para hacer copias (llamados clones) de un gen particular. Esas copias pueden ser luego separadas y usadas para estudiar la función de ese gen particular.

Práctica 11 Microscopio Estereoscopio

OBJETIVO

Conocer el uso indicado del microscopio estereoscópico así como sus partes y mantenimiento.

INTRODUCCIÓN

El microscopio estereoscópico o también llamado microscopio de disección corresponde básicamente a un microscopio compuesto de campo claro y de bajo aumento cuyos ejes ópticos presentan cierta oblicuidad entre sí, produciendo una imagen tridimensional clara de bajo aumento (normalmente entre 1,5X y 40X) y gran profundidad de foco.

El aumento alcanzado por este tipo de microscopio puede llegar hasta 200 X, pero con pérdida del efecto estereoscópico; dado el espesor de los objetos en estudio, generalmente utiliza iluminación por reflexión, presenta una distancia de trabajo entre 32 y 270 mm, apta para manipular el material en estudio. Se usa para observar objetos opacos relativamente grandes.

Los estereoscópicos  permiten hacer estudios de objetos y especímenes demasiado pequeños para ser estudiados a simple vista, pero demasiados grandes para ser estudiados bajo microscopio compuesto. Los estereoscópicos en muchas ocasiones son usados para disecar los especímenes o muestras, separando de ellas aquellas partes que serán examinadas mediante otros tipos de microscopía.

Práctica 10 Manejo, Cuidado y Mantenimiento del Microscopio

OBJETIVO

El alumno conocerá las partes del microscopio así como las funciones, el cuidado, manejo y su utilidad en el laboratorio.

INTRODUCCIÓN

El microscopio es un instrumento indispensable en el laboratorio, se usa para aumentar el tamaño de la imagen aparente de los objetos, lo cual permite observar los detalles estructurales entre otros.

El microscopio óptico normal que se usa para observar bacterias y otros componentes celulares, es un microscopio compuesto, el cual es provisto de una fuente luminosa, una lente condensadora de luz que la dirige hacia el objeto a observar y dos juegos de lentes que ayudan a la amplificación de la imagen.